12-ஆம் வகுப்பு விலங்கியல் | பாடம் 10 உயிரி தொழில் நுட்பவியலின் பயன்பாடுகள் | பாடப்புத்தக மதிப்பீட்டு வினாக்கள் | Q.No 12

12-ஆம் வகுப்பு விலங்கியல் | பாடம் 10 உயிரி தொழில் நுட்பவியலின் பயன்பாடுகள் | பாடப்புத்தக மதிப்பீட்டு வினாக்கள் | Q.No 12

கேள்வி 12 : பாலிமரேஸ் சங்கிலி வினையைப் பயன்படுத்தி விரும்பிய மாதிரியில் எவ்வாறு மரபணு பெருக்கம் செய்யப்படுகின்றது?

---

முழுமையான மதிப்பெண்கள் பெறுவதற்கான விடை :

PCR-ன் மூன்று முக்கிய நிலைகள்:

• இயல்பு திரிபு (Denaturation) :
  • இலக்கு டி.என்.ஏ-வின் இரட்டைச் சுருளானது, 95°C வெப்பநிலையில் ஒரு குறிப்பிட்ட காலஅளவிற்கு வெப்பத்திற்கு உட்படுத்தப்படுகிறது.
  • இந்த அதிக வெப்பநிலையின் விளைவாக, டி.என்.ஏ இழைகளுக்கு இடையே உள்ள ஹைட்ரஜன் பிணைப்புகள் உடைக்கப்பட்டு, இரட்டைச் சுருள் டி.என்.ஏ இரண்டு தனித்தனி இழைகளாகப் பிரிக்கப்படுகிறது.
  • இந்தப் பிரிக்கப்பட்ட தனித்த இழைகள், புதிய டி.என்.ஏ உற்பத்திக்கான வார்ப்புருக்களாகப் பணியாற்றுகின்றன.
• இணைப்பு இழை பதப்படுத்துதல் (Primer Annealing / Renaturation) :
  • வினைக் கலவையானது விரைவாகக் குளிர்விக்கப்படுகிறது.
  • இதன் காரணமாக, இரண்டு முதன்மை இணைப்பு இழைகள் (primers) இலக்கு டி.என்.ஏ-வின் தனித்த இழைகளில் அவற்றின் நிரப்புக் கார வரிசைகளுடன் இணைந்து கொள்கின்றன.
• உற்பத்தி / நீட்சி (Synthesis / Primer Extension) :
  • வினைக் கலவையின் வெப்பநிலை 75°C-க்கு உயர்த்தப்பட்டு, போதுமான காலஅளவிற்கு பராமரிக்கப்படுகிறது.
  • இச்சூழலில், Taq டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் நொதியானது (Thermus aquaticus எனும் பாக்டீரியாவிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்டது) தனித்த வார்ப்புரு டி.என்.ஏ-விலிருந்து நகலெடுத்து, முதன்மை இணைப்பு இழையை நீட்சியடையச் செய்கிறது.
  • இந்த அடைகாப்புக் காலத்தின் நிறைவில், இரண்டு வார்ப்புரு இழைகளும் பகுதியளவு இரட்டைச் சுருள் இழைகளாக மாற்றப்படுகின்றன.
• இந்த மூன்று நிலைகளும் தொடர்ச்சியாக மீண்டும் மீண்டும் நிகழும் பொழுது, தேவைப்படும் டி.என்.ஏ-வின் பன்மடங்கு நகல்கள் உற்பத்தி செய்யப்படுகின்றன. இச்செயல்முறை "டி.என்.ஏ பெருக்கம்" (DNA amplification) என அறியப்படுகிறது.
• தேவையான கூறுகள் :
• PCR-க்கு அத்தியாவசியமான முக்கியக் கூறுகள் :
  • வார்ப்புரு டி.என்.ஏ (Template DNA)
  • முதன்மை இணைப்பு இழைகள் (Primers) - இவை டி.என்.ஏ உற்பத்தியைத் துவக்கும் சிறிய ஆர்.என்.ஏ துண்டுகளாகும்.
  • Taq டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் நொதி (Taq DNA Polymerase)
  • டி-ஆக்ஸிநியூக்ளியோசைடு-ட்ரைபாஸ்பேட் (dNTPs) - இவை தளப்பொருளாகச் செயல்பட்டு, அத்தியாவசியமான ஆற்றலை வழங்குகின்றன.

---